Экспрессия и функциональные свойства NMDA- и GABAa-рецепторов при дифференцировке индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека в вентральные мезенцефалические нейроны
Антонов С.А., Новосадова Е.В., Кобылянский А.Г., Иллариошкин С.Н., Тарантул В.З, Гривенников И.А.
М.: Биохимия, 2019, №3
Ионотропные глутаматные и ГАМК-рецепторы регулируют процесс дифференцировки и определяют функциональные свойства зрелых нейронов. Как недостаточная, так и избыточная активность этих систем нейротрансмиссии ассоциирована с различными заболеваниями нервной системы. В современной литературе имеются ограниченные сведения относительно профиля экспрессии данных рецепторов и механизмов их регуляции при дифференцировке специализированных типов нейронов человека. В настоящей работе с использованием ПЦР в реальном времени и иммуноцитохимического окрашивания был изучен профиль экспрессии NMDA- и GABAA-рецепторов при дифференцировке in vitro вентральных мезенцефалических нейронов, получаемых из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) человека. Исследована связь между процессом созревания нейронов и динамикой экспрессии данных генов. Также посредством прижизненного наблюдения клеток с применением флуоресцентного кальциевого индикатора была изучена функциональная активность рецепторов. С помощью трансдукции нейральных предшественников репортерными генами TagGFP и TagRFP проанализирована роль NMDA- и GABAA-рецепторов в регуляции роста нейритов и развитии спонтанной активности изучаемых клеток. Из полученных в работе результатов следует, что агонисты изучаемых рецепторов могут быть использованы для оптимизации существующих протоколов нейральной дифференцировки ИПСК, в частности для ускорения созревания нейронов.
М.: Биохимия, 2019, №3
Ионотропные глутаматные и ГАМК-рецепторы регулируют процесс дифференцировки и определяют функциональные свойства зрелых нейронов. Как недостаточная, так и избыточная активность этих систем нейротрансмиссии ассоциирована с различными заболеваниями нервной системы. В современной литературе имеются ограниченные сведения относительно профиля экспрессии данных рецепторов и механизмов их регуляции при дифференцировке специализированных типов нейронов человека. В настоящей работе с использованием ПЦР в реальном времени и иммуноцитохимического окрашивания был изучен профиль экспрессии NMDA- и GABAA-рецепторов при дифференцировке in vitro вентральных мезенцефалических нейронов, получаемых из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) человека. Исследована связь между процессом созревания нейронов и динамикой экспрессии данных генов. Также посредством прижизненного наблюдения клеток с применением флуоресцентного кальциевого индикатора была изучена функциональная активность рецепторов. С помощью трансдукции нейральных предшественников репортерными генами TagGFP и TagRFP проанализирована роль NMDA- и GABAA-рецепторов в регуляции роста нейритов и развитии спонтанной активности изучаемых клеток. Из полученных в работе результатов следует, что агонисты изучаемых рецепторов могут быть использованы для оптимизации существующих протоколов нейральной дифференцировки ИПСК, в частности для ускорения созревания нейронов.
Дата издания: 15.04.2019